K599发根农杆菌
产品名称 | K599发根农杆菌 |
商品货号 | KL10786KRA |
基本信息 | 质粒名称K599发根农杆菌产品货号KL10786KRA载体宿主载体用途出品公司基因类型原核抗性真核抗性荧光蛋白 |
使用说明 | |
质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必先转化提质粒后使用)①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作);③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另外不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态);⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。 | |
图谱 |
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。