热启动mTTx DNA/RNA 聚合酶
描述:mTTx DNA/RNA 聚合酶经电子重构架技术,改变了 TTx 的活性配体中心,使其在 Mg 2+条件下仍然具有极强的 逆转录活性。mTTx DNA/RNA Polymerase 在 Mg 2+条件下 对于 DNA 模板和 RNA 模板扩增能力几乎无偏差,这种独 有的特性使得 mTTx 不再受限于反应 Buffer 系统,增加了 其应用的拓展性,使得多种类型的实验得以实现,包括: 采用单酶进行 TaqMan RT-PCR、在单管相同的 Buffer 系 统中对 RNA 和 DNA 进行多重检测、超多重的 RNA 模板扩 增、RNA 的 NGS 建库、高保真 RT-PCR 扩增等。
mTTx DNA/RNA Polymerase 的特性:(1)依赖于 DNA 模板的聚合酶活性;(2)极强的依赖于 RNA 模板的逆转录 活性;(3)5’-3’外切酶活性,用于 TaqMan 探针切割;(4) 金属配体离子为 Mg 2+,通常使用浓度 2-3.5mM;(5)相比 于 TTx DNA 聚合酶,mTTx 的耐热性能有所下降,92℃条 件下的半衰期为 30min;(6)热启动版本的 mTTx 在 50℃ 条件下 100%无活性,92℃加热 5min 后恢复活性;(7)以 RNA 为模板进行 RT-PCR 扩增的最大长度为 280bp,扩增 效率最高的长度为 70-150bp。
组分
储存:-20℃可保存 3 年。
活性定义:一个活力单位即在在 68°C 条件下,30 分钟内催 化 10 nmol dNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
反应实例 1. 按以下组分配制 RT-qPCR 反应液
注意:mTTx 的最佳变性温度为 92℃,其它温度条件 都会导致试剂性能下降。逆转录步骤的温度可根据实 际情况在 58-72℃调整。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!